Taken together, our findings contribute to elucidate the specific effect of miRb in MK development. Kas see on võimalik? Kui teil on täiendavaid kiloid, siis pinguldab näonaha nahk, mille kaalukaotus on dramaatiline, see langeb; Madala kvaliteediga kosmeetika kasutamine. Pealegi tõusis p19 INK4D löögi korral ka megakarüotsüütiliste geenide transkriptsioonitase joonis 7c. Seetõttu kitsendasime megakarüopoeesi võimalike miRb potentsiaalsete sihtmärkide analüüsi rakutsükli regulaatoriteni, eriti INK4 perekonda, mille liikmetel on oletatud, et neil on keskne roll G1 rakutsükli supressioonis ja MK endomitoosis. Oleme näidanud, et MK-de küpsemiseks on vajalik miRb ülesreguleerimine, mille tagajärjel tuleks selle oletatavaid sihtmärke selle protsessi ajal alla reguleerida.
On soovitatud, et mikroRNA-l miRb oleks oluline roll megakarüotsüütide-erütroidsete eellaste enesearendamisel ja trombotsüütide tekitamisel. Kuid miRb on kriitiline ka vereloome tüvirakkude enesesuuendumisel.
Relvaseadus (lühend - RelvS)
Seega tuleb miRb funktsiooni ja megakarüopoeesi reguleerivaid keerukaid signaalimisradasid veel selgitada. Selles uuringus uuriti tähelepanelikult miRb endogeenset ekspressiooni megakarüotsüütide diferentseerumise ajal. Vastavalt sellele nõuab vereloome tüvirakkude diferentseerimine miRb allareguleerimist, samas kui megakarüotsüütide määramine ja küpsemine sünkroniseeruvad miRb akumuleerumisega.
- Milline poiste liige summa
- Kuidas suurendada liikme folk meetodi suurust
- Suurenda Sex Dick
- Relvaseadus – Riigi Teataja
- Kursused - Matemaatika ja statistika instituut
- Peenise tuubid ja suurus
MiRb üleekspressioon parandab K ja UT-7 rakkude megakarüotsüütilist diferentseerumist. Lisaks näitab miRb etapispetsiifiline üleekspresseerimine primaarsetes rakkudes, et miRb vahendab megakarüotsüütilise diferentseerumise võimendamist pärast megakarüotsüütide määramist, st etappi, kus megakarüotsüüdid on vereloome eellasmarkeri CD34 ekspressiooni suhtes negatiivsed.
P19 INK4D üleekspressioon tühistab need toimed, millele viitab megakarüotsüütide markerite vähenenud ekspressioon, Suurendas 5 cm liiget 6 paeva jooksul seiskumine ja polüploidsuse vähenemine.
Need kokkuvõtlikult viitavad sellele, et miRb ekspressioon reguleerib positiivselt megakarüotsüütide arengut alates megakarüotsüütide määramise algfaasidest ja p19 INK4D on üks peamisi miRb aktiivsuse vahendajaid megakarüotsüütide polüploidsuse alguses.
Peamine Trombotsütopeenia, trombotsüütide PLT puudulikkus veres, ähvardab miljoneid inimesi, sealhulgas patsiente, kes saavad suurtes annustes keemiaravi, ja aplastilise aneemia või hepatiidiviirusega seotud tsirroosiga patsiente. PLT tootmise eest vastutavad rakud on megakarüotsüüdid MK.
MK küpsemise aluseks olevate mehhanismide mõistmine hõlbustab ex vivo PLT tootmist trombotsütopeenia terapeutiliseks kasutamiseks ja kliiniliseks raviks. Seetõttu on ülioluline avastada seos miRb ja megakarüotsütopoeesi vahel.
Category: Health & Beauty
Kuigi Klusmanni jt uurimus. Selles uuringus tuvastasime süstemaatiliselt miRb rolli MK-de ja selle funktsiooni vahendava sihtgeeni, rakutsükli inhibiitori p19 INK4D eristamisel. Esiteks uurisime miRb raku koguekspressiooni megakarüoidi diferentseerivates rakkudes. RNA koguti iga 3 päeva tagant, alates päevast 0 kuni 15 päeva kestnud induktsioonini.
Kuigi miRb ekspressioon primaarsetes rakkudes näitas üksikute doonorite vahel teatavat varieeruvust, suurenes see kõigis analüüsitud proovides järk-järgult ja märkimisväärselt PLT-des.
MiRb ülesreguleerimine Kes suurendab liige korrelatsioonis MK määramise ja küpsemisega. Eri etappide morfoloogilist erinevust näitas Wright — Giemsa värvimine. Mõõdeti üle raku viiest juhuslikust vaatest.
Kiire viis laiendada oma peenist ilma operatsioonita
Vearibad tähistavad standardhälvet SD. Statistiliseks analüüsiks kasutati Dunnetti testi T 3. MK-spetsiifiline induktsioon algab inimese primaarsete HSC-dega. MiRb muutusi hinnati qPCR abil. Rakud saadi kolmelt erinevalt doonorilt. Statistiliseks analüüsiks kasutati Bonferroni mitmekordse võrdlustesti.
Suurenda liige 1 nädal kuni 15 cm
Kolm populatsiooni eraldati vastavalt CD41 ja CD61 ekspressioonitasemele joonis fig 1c. K ja UT-7 rakke saab indutseerida diferentseerumiseks megakarüoblastiliste omadustega rakkudeks, töödeldes forbolmüristatatsetaadiga PMA. Võrdlesime miRb ekspressiooni diferentseerimata ja PMA-ga töödeldud rakkudes.
Kui võrrelda miRNA ekspressiooni töötlemata rakkudes ja 3 päeva kultiveeritud rakkudes PMA-ga, täheldati pärast PMA-ga töötlemist K rakkudes miRb 6, 5-kordset ülesreguleerimist joonis 2d, ülemine paneel.
Sarnaselt viis UT-7 rakkude megakarüotsüütiline diferentseerimine miRb rikastamiseni kordne joonis 2d, alumine paneel. Need tähelepanekud viitavad sellele, et miRb võib olla positiivselt seotud megakarüotsüütilise diferentseerumisega.
Rakud värviti Wright-Giemsa lahustega. Ploidsusrežiimis tähistab esimene rakutsükkel diploidsust, mida näitab punane värv. Teine tsükkel on polüploidne, värvus kollane. S-faasi tähistavad valged ja siniste joontega täidetud piigid.
- Liikme suurus ja meeste kasv
- Suurus suurima peenise maailmas
- Suurenda liige 18
- Keskmise peenise pikkus
Diploidsuse G1 ja S faasi rakud on kromosoomide arvu järgi 2N. MiRb endogeenne ekspressioon megakarüotsüütilistes rakkudes suureneb pärast PMA-ravi. U6 kasutati endogeense miRNA ekspressiooni kontrollina.
Kõiki andmeid väljendatakse vähemalt kolme sõltumatu katse keskmisena ± SD. Statistiliseks analüüsiks kasutati õpilaste t- teste. Seetõttu ekspresseerisime miRb üle Suurendas 5 cm liiget 6 paeva jooksul ja UT-7 rakkudes, et teha kindlaks, kas MK diferentseerumise ajal täheldatud miRb ülesreguleerimine omab rolli MK küpsemise kontrollimisel. Küpse miRb edukas üleekspressioon mõlemas rakuliinis on näidatud joonisel 3a.
Seejärel kultiveeriti rakke megakarüootse diferentseerumise ja küpsemise esilekutsumiseks söötmes, mis sisaldas 1 nM PMA. MiRb üleekspressioon soodustas MK-integriinide ekspressiooni joonis 3c.
Veel üks MK-i diferentseerumise indikaator on MK-liini jaoks oluliste geenide ekspressioon, mis reguleerivad MK-de liini-spetsiifilist diferentseerumist ja iseloomustavad inimese MK-de megakarüotsüütiliste geenide küpsemist.
Sarnaselt voolutsütomeetriaga täheldatule tuvastati CD61 ja teiste oluliste megakarüotsüütiliste geenide kõrgem ekspressioon ka pcDNA3.
MiRb üleekspressioon soodustab K ja UT-7 rakkude megakarüotsüütilist diferentseerumist ja polüploidsust. MK-markergeenide suhtelist ekspressiooni analüüsiti qPCR abil.
Näidatud on tüüpilised voolutsütomeetrilised graafikud. Tsütospiini abil valmistatud MK-d värviti Wright-Giemsa lahustega. Parempoolsel paneelil on näidatud representatiivne eksperiment, samuti rakkude keskmine ± SD protsent igas ploidsuses 2N, punane; 4N, kollane; 8N, sinine.
Kõiki andmeid väljendatakse nelja sõltumatu katse keskmisena ± SD. Statistiliseks analüüsiks kasutati T- teste. Ja pärast täiendavat 6-päevast ravi oli rakkude suuruse ja ploidsuse suurenemine ilmne joonis 3e.
Ploidsusanalüüs voolutsütomeetria abil näitas, et kuigi suurem osa PMA töötlemise tulemusel saadud polüploidsetest rakkudest oli 4N, mis näitab ebaküpseid MK eellasrakke, tõusis pcDNA3. Lisaks määrasime, kas miRb aitab kaasa inimese primaarsete vereloome tüvi- ja eellasrakkude MK diferentseerumisele. Rakke kasvatati megakarüotsütaarses diferentseerimissöötmes ja transfekteeriti 1.
MiRb matkimise transfektsioon suurendas miRb taset, võrreldes NC-rakkudega, kordselt joonis 4a. Seejärel hindasime miRb üleekspressiooni mõju MK-markeritele ja megakarüotsüütilistele geenidele.
Rakke kasvatati megakarüotsütaarses diferentseerimissöötmes 6 päeva ja transfekteeriti ajutiselt miRb miimika või inhibiitoritega 1. A miPb suhteline ekspressioon analüüsiti qPCR abil. Nitroglutseriin salvi liikme suurendamiseks kasutati katses majapidamiskontrolliks. Rakud saadi neljalt erinevalt doonorilt ja iga proovi testiti andmete esitamiseks kolme sõltumatu eksperimendiga.
Kõiki andmeid väljendatakse keskmisena ± statistilises analüüsis kasutati SD-i õpilase t- teste. Spetsiifiliste inhibiitorite kasutamisega reguleeriti miRb ekspressiooni MNC-des üle viiekordse reguleerimise joonis 4d.
MiR-125b moduleerib megakarüotsüütide küpsemist, suunates rakutsükli inhibiitori p19INK4D
Nagu arvata võis, aeglustasid miRb inhibiitorid MK diferentseerumist. MNC-de heterogeensus võib aidata kaasa selles uuringus täheldatud ebaselgele mõjule. Kuna endogeense miRb ekspressioon varieerub sõltuvalt MK-de diferentseerimise staadiumist joonis 1eeldati miRb etapispetsiifilist mõju ja seda analüüsiti. Megakarüopoeesi ajal näitas CD61 ekspressioon aja jooksul kõige nähtavamat ja progressiivsemat kasvu, samal ajal kui CD34 pinnaekspressioon vähenes.
Pärast eraldamist värvisime rakud CD34 ja CD61 vastaste antikehadega ja uurisime miRb endogeenset ekspressiooni joonised 5a — c. Mõõdeti üle 50 pro-MK-i viiest juhuslikust vaatest. Promegakrüotsüütidega tehtud uuringud näitasid, et nii varaseid CD41 ja CD61 kui ka hiliseid CD42b megakarüotsütaarseid pinnamarkereid saab pärast induktsiooni tuvastada voolutsütomeetria abil.